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非靶向代谢组学

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非靶向代谢组学(Untargeted Metabolomics),也称为非目标代谢组学或发现代谢组学,无偏向性地对所有小分子代谢物同时进行检测分析的代谢组学。
产品详情

一、项目介绍

代谢组(Metabolme)指参与新陈代谢、维持生物体正常生长功能和生长发育的所有内源小分子。代谢组学(Metabolmics)是研究生物体系(细胞、组织 或生物体)受刺激或扰动后(如基因改变或环境变化后)其代谢产物(内源性代谢物质)种类、数量及其变化规律的科学。研究对象:一般来说,150Da以下的小分子物质。

二、项目内容

1.非靶向代谢组学

非靶向代谢组学(Untargeted Metabolomics),也称为非目标代谢组学或发现代谢组学,无偏向性地对所有小分子代谢物同时进行检测分析的代谢组学。

实验流程:

三、送样要求

样本类型

样本量

简要采集方法

注意事项

植物组织

 ≥1g/例

采集后迅速液氮中冷冻,做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。


动物组织

≥500mg/例

采集后用生理盐水清洗残留血液,在冰上将组织样本切割成 20~50 mg 左右的小块,置于液氮中速冻约 10 s,将速冻后的组织块分装冻存管中,做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。

麻醉剂建议使用异氟醚;大块组织需要切成小块,方便储存和取样。

微生物

干重

≥250mg/例

采集适量菌液置于无菌离心管中,在4,000 g,4℃下离心 3 min,分离菌体,用预冷 PBS 溶液清洗菌体两遍。4,000 g,4℃下离心 3 min,分离得到菌体,液氮淬灭。收集干净菌体即可用于细胞内代谢物分析,上清液可用于细胞外代谢物分析,储存于液氮或-80℃冰箱中。


细胞

1×107 /例

  1. 贴壁细胞:取对数生长期细胞,去掉培养液,用适量预冷 PBS 清洗两遍,再加入少量 PBS,用细胞铲刮下细胞,置于 1.5 mL 离心管中,在 1,000 g,4℃离心 1 min,液氮淬灭。

  2. 悬浮细胞:取对数生长期细胞液,在 1,000 g,4℃离心 1 min,去掉培养液,使用预冷 PBS  清洗细胞两遍,置于 1.5  mL 离心管中,在 1 000 g 离心 1 min,液氮淬灭。

  3. 收集的细胞即可用于细胞内代谢物分析,上清液可用于细胞外代谢物分析。所有样本均做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。

采集过程中需要对细胞进行计数,数量为≥107/例,务必保持样本量的一致性。

尿液

动物:

≥250 μL/例

临床样本:

≥1 mL/例

尿液 8,000 rpm,10 min,离心,用移液器小心吸取上清,分装至冻存管中,储存于液氮或-80℃冰箱中。

动物样本如大鼠,需添加叠氮化钠作为防腐剂。

粪便

≥500mg/例

  1. 动物自然排便法:将实验动物置于代谢笼中,1 只/笼,收集 12 h 或 24 h 粪便;

  2. 动物肠道提取法:处死动物后,分离肠道,提取内容物;

  3. 人粪便采集:采集前先排尿。患者将粪便排于清洁、干燥、无吸水性的容器内,用小勺分别取两端和中部的内外部的粪便样本。采集粪便后,放入做好标记的冻存管中,立即置于液氮中速冻,储存于液氮灌或-80℃冰箱中。


血浆

≥250μL/例

全血采集至抗凝blood collection管(紫头血液采集管)后,1,600 g离心,时间 15 min,温度 4℃。离心后用移液器小心吸取上部清液至洁净的离心管中并分装至冻存管中,做好标记。置于液氮中速冻,后储存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反复冻融。

血清

≥250μL/例

红头血液采集管采集到的全血室温下放置 30 min;凝血结束后,离心条件为:1,500 g离心力,时间 10 min。离心后上清液即为血清,用移液器小心吸取并分装至洁净的冻存管中,做好标记置于液氮中速冻,储存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反复冻融。

体液

500μL×2

  1. 采用刮板收集,注意避免使用棉签或金属材质,以玻璃、聚丙烯为最佳,可以使用木质材料。离心取上清后分装,每管不低于 500μL(精确量取),-80℃冻存。

  2. 吸取采集后,离心取上清后分装,每管不低于 500μL(精确量取),-80℃冻存



非靶向代谢组学
非靶向代谢组学

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非靶向代谢组学(Untargeted Metabolomics),也称为非目标代谢组学或发现代谢组学,无偏向性地对所有小分子代谢物同时进行检测分析的代谢组学。
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一、项目介绍

代谢组(Metabolme)指参与新陈代谢、维持生物体正常生长功能和生长发育的所有内源小分子。代谢组学(Metabolmics)是研究生物体系(细胞、组织 或生物体)受刺激或扰动后(如基因改变或环境变化后)其代谢产物(内源性代谢物质)种类、数量及其变化规律的科学。研究对象:一般来说,150Da以下的小分子物质。

二、项目内容

1.非靶向代谢组学

非靶向代谢组学(Untargeted Metabolomics),也称为非目标代谢组学或发现代谢组学,无偏向性地对所有小分子代谢物同时进行检测分析的代谢组学。

实验流程:

三、送样要求

样本类型

样本量

简要采集方法

注意事项

植物组织

 ≥1g/例

采集后迅速液氮中冷冻,做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。


动物组织

≥500mg/例

采集后用生理盐水清洗残留血液,在冰上将组织样本切割成 20~50 mg 左右的小块,置于液氮中速冻约 10 s,将速冻后的组织块分装冻存管中,做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。

麻醉剂建议使用异氟醚;大块组织需要切成小块,方便储存和取样。

微生物

干重

≥250mg/例

采集适量菌液置于无菌离心管中,在4,000 g,4℃下离心 3 min,分离菌体,用预冷 PBS 溶液清洗菌体两遍。4,000 g,4℃下离心 3 min,分离得到菌体,液氮淬灭。收集干净菌体即可用于细胞内代谢物分析,上清液可用于细胞外代谢物分析,储存于液氮或-80℃冰箱中。


细胞

1×107 /例

  1. 贴壁细胞:取对数生长期细胞,去掉培养液,用适量预冷 PBS 清洗两遍,再加入少量 PBS,用细胞铲刮下细胞,置于 1.5 mL 离心管中,在 1,000 g,4℃离心 1 min,液氮淬灭。

  2. 悬浮细胞:取对数生长期细胞液,在 1,000 g,4℃离心 1 min,去掉培养液,使用预冷 PBS  清洗细胞两遍,置于 1.5  mL 离心管中,在 1 000 g 离心 1 min,液氮淬灭。

  3. 收集的细胞即可用于细胞内代谢物分析,上清液可用于细胞外代谢物分析。所有样本均做好标记,储存于液氮或-80℃冰箱中。

采集过程中需要对细胞进行计数,数量为≥107/例,务必保持样本量的一致性。

尿液

动物:

≥250 μL/例

临床样本:

≥1 mL/例

尿液 8,000 rpm,10 min,离心,用移液器小心吸取上清,分装至冻存管中,储存于液氮或-80℃冰箱中。

动物样本如大鼠,需添加叠氮化钠作为防腐剂。

粪便

≥500mg/例

  1. 动物自然排便法:将实验动物置于代谢笼中,1 只/笼,收集 12 h 或 24 h 粪便;

  2. 动物肠道提取法:处死动物后,分离肠道,提取内容物;

  3. 人粪便采集:采集前先排尿。患者将粪便排于清洁、干燥、无吸水性的容器内,用小勺分别取两端和中部的内外部的粪便样本。采集粪便后,放入做好标记的冻存管中,立即置于液氮中速冻,储存于液氮灌或-80℃冰箱中。


血浆

≥250μL/例

全血采集至抗凝blood collection管(紫头血液采集管)后,1,600 g离心,时间 15 min,温度 4℃。离心后用移液器小心吸取上部清液至洁净的离心管中并分装至冻存管中,做好标记。置于液氮中速冻,后储存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反复冻融。

血清

≥250μL/例

红头血液采集管采集到的全血室温下放置 30 min;凝血结束后,离心条件为:1,500 g离心力,时间 10 min。离心后上清液即为血清,用移液器小心吸取并分装至洁净的冻存管中,做好标记置于液氮中速冻,储存于液氮或-80℃冰箱中。

避免溶血,避免反复冻融。

体液

500μL×2

  1. 采用刮板收集,注意避免使用棉签或金属材质,以玻璃、聚丙烯为最佳,可以使用木质材料。离心取上清后分装,每管不低于 500μL(精确量取),-80℃冻存。

  2. 吸取采集后,离心取上清后分装,每管不低于 500μL(精确量取),-80℃冻存



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